Особенности проведения впч скрининга для выявления вируса. Анализы на выявление ВПЧ: типы, особенности исследований и расшифровка результатов Скрининг на наличие вирусов папилломы человека высокого канцерогенного риска

array(19) { ["catalog_code"]=> string(6) "031210" ["name"]=> string(114) "ВПЧ-тест расширенный (с определением количества и типа вируса)" ["period"]=> string(1) "3" ["period_max"]=> string(1) "7" ["period_unit_name"]=> string(6) "к.д." ["cito_period"]=> NULL ["cito_period_max"]=> NULL ["cito_period_unit_name"]=> NULL ["group_id"]=> string(6) "450675" ["id"]=> string(4) "2834" ["url"]=> string(29) "vpch-test-rasshirennyj_031210" ["podgotovka"]=> string(750) "

Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Соскоб из урогенитального тракта (у женщин: цервикальный канал) : Мазки не следует брать:

• во время менструации;
• ранее 5 дней после использования вагинальных свечей, тампонов или спермицидов;
• после вагинального исследования (УЗИ малого таза, кольпоскопия), спринцевания;
• ранее 24-48 часов после полового контакта.

Метод исследования: ПЦР

Данный тест показан только для женщин

Исследование позволяет определить тип ВПЧ высокого онкогенного риска и концентрацию. К группе ВПЧ высокого канцерогенного риска (ВКР) относятся 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 68 генотипы. Наиболее канцерогенными считаются 16 и 18 типы, наименее – 51, 56, 68. Более 80% инфицированных ВПЧ спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Типы ВПЧ ВКР наряду с остроконечными кондиломами и дисплазиями легкой степени, также способствуют злокачественной трансформации эпителия шейки матки, приводящей к инвазивному раку.

ПОКАЗАНИЯ К ИССЛЕДОВАНИЮ:

• Скрининговые программы с цитологическим исследованием для женщин старше 30 лет
• Обследование при неопределенных и сомнительных результатах цитологических исследований
• Проведение дифференциальной диагностики с заболеваниями непапилломавирусной этиологии
• Контроль эффективности терапии тяжелой дисплазии шейки матки (CIN2+) через 6 месяцев после удаления пораженного эпителия

ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ:

Референсные значения (вариант нормы):

Пример результата исследования – ОБНАРУЖЕНО

Пример результата исследования – Не обнаружено

Выявление ДНК ВПЧ свидетельствует о наличии возбудителя. При интерпретации результатов следует учитывать, что более 80% инфицированных спонтанно излечиваются в течение 12–24 мес. Опасность представляет сохраняющаяся более 12–24 мес. инфекция.

Обращаем Ваше внимание на то, что интерпретация результатов исследований, установление диагноза, а также назначение лечения, в соответствии с Федеральным законом № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» от 21 ноября 2011 года, должны производиться врачом соответствующей специализации.

" ["serv_cost"]=> string(4) "1535" ["cito_price"]=> NULL ["parent"]=> string(3) "450" => string(1) "1" ["limit"]=> NULL ["bmats"]=> array(3) { => array(3) { ["cito"]=> string(1) "N" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(12) "Соскоб" } => array(3) { ["cito"]=> string(1) "N" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(78) "Соскоб/отделяемое из цервикального канала" } => array(3) { ["cito"]=> string(1) "N" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(57) "Соскоб/отделяемое из влагалища" } } }

Вирус папилломы человека – один из самых прогрессирующих заболеваний. Это бич современности, и стоит этот недуг наравне с ВИЧ. Более 70% населения планеты уже заражены таковым, и ежегодно количество инфицированных возрастает на десятки тысяч. Сам вирус опасен лишь в определенных случаях. Главное, заметив на коже новообразования, обратиться к специалисту. Применяя ВПЧ скрининг, медики определяют вид вируса и его степень. Только после такого высокотехнологичного анализа больному назначается лечебная терапия, связанная с применением противовирусных и иммуностимулирующих препаратов. А также врачом даются рекомендации по удалению новообразований.

Скрининг ВПЧ показывает штамм и концентрацию вируса

Причины заражения вирусом папилломы

ВПЧ передается разными способами. Заразиться можно тактильным способом, непосредственно с больным или с его личными вещами. Вирусные микроорганизмы могут оставаться на поверхности любых предметов, но без человека через некоторое время погибают. Часто ВПЧ инфицируются люди, посетившие места общего пользования. Таковых большое количество. Заразиться можно через поручень в городском транспорте, купаясь в бассейне, принимая душ и т.д. Вариантов подцепить вирус очень много. Что самое интересное – инфицирование и прогрессирование вируса в организме происходит бессимптомно.

Внешние признаки появляются только в периоды сбоя работы иммунной системы или когда нарушается целостность кожного покрова. В такие моменты, вирус папилломы активизирует свои клетки и на коже появляются новообразования. Таковые наросты имеют доброкачественную структуру, но некоторые виды таковых могут при воздействии определенных факторов трансформироваться в злокачественные опухоли.

Внешние признаки развития недуга

Первые внешние признаки недуга проявляются в виде одной или нескольких бородавок. В зависимости от того, насколько ослаблена иммунная система человека, количество наростов может достигать нескольких сотен. Такое заболевание называют папилломатозом.

У женщин вирус ВПЧ может стать причиной развития рака шейки матки. По статистическим данным, людей, страдающих таковым онкологическим заболеванием, половые кондиломы имеются в 8 из 10 случаев. Именно эти кожные наросты являются главной проблемой, которая угрожает жизни красивой половины человечества. Свои «продукты деятельности» этот вирус оставляет не только на внутренних половых органах. Часто кондиломы появляются и в ротовой полости, а также на половых губах и клиторе. При обнаружении первых симптомов, не стоит затягивать с диагностикой. Чем раньше инфицированный обратится к врачу, тем больше шансов быстро одолеть недуг.

Часто ВПЧ подвергаются беременные девушки. Организм таковых, подвергается большим нагрузкам во время вынашивания ребенка.

Эпителий половых органов, а также кожный покров живота и груди растягивается, образовывая микроповреждения. У инфицированных ВПЧ на таковых местах появляются наросты. Если в период беременности возникает такая проблема, то следует ее решить в первые два триместра. В противном случае – могут быть осложнения при родах.

ВПЧ может нести ответственность за возникновение рака в разных частях тела человека

Скрининг вируса папилломы и основные исследования

Диагностирование – важное мероприятие, которое позволяет выявить ВПЧ на ранних этапах заражения организма. Современные высокотехнологические анализы способны показать есть ли склонность к развитию злокачественных опухолей. Медики рекомендуют проводить регулярные обследования. Особенно это касается женщин. Скрининг проводится один раз – в возрасте до 30 лет. Если результат неудовлетворительный, то рекомендуется пройти повторное исследование.

Даже если человек пройдет терапевтический курс лечения и избавится от проблемы, ему все равно необходимо систематически посещать специалиста для диагностики. Обычно такие манипуляции проходят раз в 3 года.

Скрининг при ВПЧ

Скрининг – неотъемлемая часть процедур диагностики, касающихся предупреждения развития онкологических заболеваний. Для женщин, анализ берут путем забора биологического материала – мазка с поверхности шейки матки. Таковая операция не опасна и безболезненна. Единственное, что необходимо предусмотреть – это подходящие для анализа дни. Процедуру нельзя производить во время месячных. Благодаря современной медицине, результат анализа обладает почти 100% точностью. Проводить повторный скрининг не нужно. Если по результатам анализа, показатель наличия хотя бы одного вида ВПЧ будет подтвержден, врачом будет назначены дополнительные исследования, более узкого профиля.

Полученные результаты скрининга ложатся в основу рекомендуемого врачом лечения

Разновидности скрининга

Сам скрининг может проводиться несколькими способами:

• Цитологическим ПАП-тестом (жидкостный вид);
• Скрининг расширенного вида;
• Цепной реакцией (анализ ПЦР).

Точный вид скрининга, который необходимо провести зараженному ВПЧ, определяет врач. Папилломавирус имеет более 130 разновидностей. Каждый отдельный вид исследования позволяет указать склонность клеток к трансформации в злокачественную опухоль.

ПАП-тест – что это такое? Это анализ биологического материала – цервикального соскоба. После его забора, материал помещают в специальную жидкость. Такое сочетание, клеток кожи и транспортной среды, дает более точные результаты, чем у обычного цитологического метода.

Преимущество жидкостного метода заключается в количестве возможных тестов, которые можно провести использую один биологический материал. Это достигается из-за специального состава жидкостной среды. Именно такой метод позволяет определить и выявить ВПЧ на самых ранних стадиях своего существования в организме человека. Сам анализ проводится по методу Бетезда. Результат такового – оценка, по которой врач определяет дальнейшие действия, диагностировать дальше или назначать лечение. Такой метод используется только в некоторых странах, таких как США и Великобритания, преимущественно у женщин, чей возраст больше 30 лет.

ПАП-тест — анализ цервикального соскоба

Расширенный скрининг определяет онкогенные типы ВПЧ и количество зараженных клеток в организме. Таковых известно около 50. А ВПЧ ВКР скрининг шейки матки определяет 15 опасных видов вируса. Отечественная медицина не имеет соответствующего оборудования, поэтому показатель ПЧ у нас в стране 12. Если результаты анализа на наличие вируса, отрицательные, это не означает, что человек здоров. Его организм может быть подвержен оставшимся трем типам ПЧ. Вирусная нагрузка определяется из совокупности показателей всех типов ВПЧ, поэтому и такой показатель не будет точным. Что очень важно, существует высокий канцерогенный риск возникновения рака от сложных типов заболевания. Поэтому, медики часто советуют пройти другой скрининговый анализ.

Анализ на полимерно-цепную реакцию

Анализ на ПЦР – совершенно другое исследование. Диагностика ВПЧ таковым методом позволяет осуществить проверку биологического материала на наличие всех типов вируса, без какого-то определенного исключения. Полимерно-цепная реакция не требует выявления антител возбудителя заболевания, а сразу выявляет вирус. Благодаря такому методу, результаты ПЦР являются более точными, чем в случае обычного цитологического теста.

Сам принцип работы исследования полимерной реакции, состоит в смешивании клеток возбудителя и реагента. Из-за реакции жидкости на нуклеиновую кислоту, результат теста будет иметь 100% точность.

Полимеразная ДНК увеличивает количество и объем микробных микроорганизмов. Параллельно увеличивается и количество полимеров. Таковые операции делаются, пока вирус не можно будет увидеть через микроскоп. Таковые исследования не дорогие и простые, поэтому их проводят во многих лабораториях отечественных медицинских учреждений. Для проведения такого анализа используют:

• матрица ДНК;
• элементы, соединяющие концы используемого биологического материала;
• ДНК-полимераза;
• вспомогательные вещества химического рода;
• раствор для создания требуемых условий к проведению анализа.

Само исследование состоит из трех основных этапов: элонгации, денатурации и отжига. Анализ производится вкруговую до 35 раз, в зависимости от факторов определенного случая.

Кроме выявления ВПЧ, таковым способом можно определить и микроорганизмы других заболеваний: хламидиоза, кандидоза, ВИЧ-инфекции, микоплазмоза и т.д. Наблюдается 100% точность результата.

Анализ на ПЦР позволяет увидеть вирус под микроскопом

Преимущества метода полимерно-цепной реакции

Если сравнивать метод полимерной реакции с другими типами исследований, то можно выделить такие преимущества:

1. Высоко эффективность. Анализ полимерной реакции обладает высокой чувствительностью. Даже плохо взятая проба покажет 100% качественный результат.
2. Для проведения исследования полимерно-цепной реакции подходит любой тип биологического материала. Для выявления ВПЧ можно использовать: слюну, половые выделения, каплю крови или клетки кожи. Чаще всего используется соскоб поврежденного участка эпителия.
3. Быстрота получения результата. При исследовании материала на наличие ВПЧ, результат будет известен уже через 4-5 часов после окончания процедуры.
4. Высокая точность показателей.
5. Возможность определения нескольких типов ВПЧ из одной биологической пробы. Таковое исследование позволяет сэкономить не только время, но и затраченные на диагностику денежные средства.
6. Даже комплексное обследование полимерно-цепной реакции имеет приемлемую стоимость.
7. Доступность. Таковые исследования можно произвести практически в каждой медицинской лаборатории.

Анализ полимерно-цепной реакции самый выгодный вариант исследования на наличие ВПЧ в организме человека. Это обусловлено точностью результата и возможностью определить все типы вируса.

Для анализа на ПЦР достаточно сдать кровь

Что делать с результатами скрининга

Только после того, как инфицированный ВПЧ, получит ответ на наличие и концентрацию инфекционных ДНК, проводится консультация со специалистом. Врач определяет, какой метод лечения больше всего подходит под определенный случай. На бланке с результатами исследований имеется всего две шкалы. Одна – отрицательный показатель, другая — положительный. По размещенному ответу на наличие того или иного вируса в организме, врач с точностью в 99% устанавливает диагноз инфицированного и назначает соответствующее лечение. Чаще всего, для восстановления здоровья больного назначают иммуностимулирующие препараты, противовирусные средства и один из методов удаления папиллом.

Внешние признаки ВПЧ можно убирать несколькими способами: хирургическим путем, лазером или коагулированием. Современная медицина пытается решить проблему без применения скальпеля, так как после такового вмешательства на коже остаются рубцы.

Если новообразования находятся на открытых частях тела: лице, шее, ладонях и т.д., то лучше использовать для удаления лазер или коагулятор. Операция таковыми устройствами будет более быстрой, а восстановление работоспособности не займет больше одного часа. После операции лазером не остается видимых шрамов, очищенный от кожного новообразования участок через несколько дней приобретает оттенок кожи человека.

ВПЧ скрининг — это комплекс диагностических мероприятий, который позволяет выявить наличие вируса папилломы человека в организме. Проводится по определенной схеме, чтобы получить подробное описание болезни, сэкономить время и деньги пациента.

Согласно статистическим данным, около 80% населения планеты являются носителями вируса папилломы человека. Патология распространяется среди людей контактно-бытовым, половым, вертикальным путем. Папилломатоз может протекать бессимптомно.

Первыми признаками хронической персистенции инфекции будут папилломы на теле. Образования не болят, не чешутся. Пациент спокойно живет с ними. Опасность болезни состоит в том, что можно инфицироваться ВПЧ высокого онкогенного риска. Такой тип вируса часто обнаруживают в очагах злокачественных опухолей.

Чтобы избежать смертельного исхода заболевания, следует ежегодно проходить обследования, которые назначает пациенту лечащий врач.

Первый этап скрининга для женщин начинается с гинекологического кабинета. Врач проводит обязательный осмотр внешних и внутренних половых органов, берет мазок по Папаниколау, который покажет наличие воспалительных изменений в области цервикального канала, влагалища, мочеиспускательного канала. Онкоцитология проводится всем женщинам. У мужчин патологические изменения урогенитального тракта определяются с помощью мазка из уретры. Его берет врач-уролог или дерматолог.

При наличии папиллом на половых органах, анальной области, атипических клеток в результатах цитологии, гинеколог, уролог направляют пациентов на специальное исследование под названием ПЦР. Оно показывает концентрацию вируса в организме. Для исследования используют мазок из цервикального канала и уретры.

Выявление высокой концентрации ВПЧ говорит об инфицировании папилломатозом.

Пациент направляется на сдачу дайджен теста, который покажет риск развития онкопатологии.

Типы ВПЧ

Медицине известно о существовании около 170 разновидностей ВПЧ. Они отличаются по форме, размерам, степени канцерогенности. Все виды вируса разделены на группы соответственно онкогенному риску:

1. 1-3, 5 штаммы вируса никогда не вызывают рака. Провоцируют появление папиллом, которые после нормализации функций иммунной системы исчезают самостоятельно.
2. Вирус папилломы человека низкого онкогенного риска не приводят к онкопатологии. Вызывают образование бородавок. В группу входят папилломавирусы 6, 11, 44 типов.
3. Для определения ВПЧ ВКР проводят скрининг. Такие виды вируса являются канцерогенными. После его прохождения на наличие одного из 15 типов, сопровождающих рак, врач определяет дальнейшие действия. Опасными считаются 16, 18 штамм. Расширенное обследование помогает не допустить развитие злокачественных опухолей (аденокарцином, плоскоклеточного рака).

Методы скрининга hpv

Для раннего выявления ВПЧ высокого онкогенного риска в организме используют современные высокочувствительные методы исследования. Полимеразно-цепная реакция + Дайджен тест + онкоцитология — золотой стандарт в диагностике папилломавирусной инфекции. Перечисленные исследования назначаются пациентам по следующим показаниям:

1. Женщины после 30 лет имеют высокий риск заразиться ВПЧ. Ненадежные сексуальные партнеры, их частая смена — основные причины инфицирования. У мужчин папилломавирус редко вызывает злокачественные процессы урогенитального тракта. Страдает в основном женская половина населения. Около 5000 женщинам ежегодно выставляется диагноз — рак шейки матки. Мазок по Папаниколау рекомендовано сдавать 1 р/год, чтобы своевременно выявить перерождение эпителия шейки матки.
2. Наличие на теле бородавок – повод для детального обследования организма.

ПЦР

Полимеразно-цепная реакция – высокочувствительный количественный метод исследования папилломатоза. Для проведения скрининга необходим соскоб из цервикального канала у женщин и мазок из уретры у мужчин.

Для получения результата применяются специфические ферменты, которые производят многократное копирование ДНК вирусов из исследуемой пробирки. Полученные фрагменты лаборанты сверяют с образцами из своей базы. Пациент получает заключение о концентрации и генотипе вируса.

Скрининг-анализ проводится в специальном приборе под названием амплификатор. Он нагревает и охлаждает пробирки до необходимых температур. Минимальные колебания температурного режима могут отразиться на результатах диагностики.

К положительным сторонам метода относятся:

1. Для исследования на наличие ВПЧ подойдет мазок.
2. Метод определяет наличие вируса даже при небольшом количестве молекул ДНК в исследуемом материале.
3. Анализ способен выявить сразу несколько возбудителей патологий.
4. Результаты человек получает через 7 часов после сдачи биоматериала.

Среди негативных сторон данного исследования выделяют:

1. Метод требует высокой квалификации персонала, соблюдения всех требований во время работы с аппаратом. Минимальные нарушения технологии могут привести к ложному результату.
2. Скрининг не показывает тип папилломавируса. Нельзя говорить о риске развития онкологии.

Чтобы получить точный результат, необходимо правильная подготовка к исследованию:

1. Перед процедурой воздержаться от половых контактов в течение 1 недели.
2. Нельзя проводить спринцевание.
3. Диагностика не проводится во время месячных.

Расшифровкой результатов занимается лечащий врач.

Digene-тест

Digene-тест — современный метод определения онкогенных штаммов ВПЧ. Для проведения исследования используются специальные ферменты ДНК.

Для проведения диагностики потребуется мазок из стенки шейки матки или уретры. Перед процедурой желательно воздержаться от сексуального контакта, провести гигиенические процедуры на половых органах. Врач возьмет мазок и направит на лабораторное исследование. Параллельно берется соскоб для онкоцитологии. Оба метода считаются золотым стандартом определения вируса папилломы человека. Скрининг hpv расширенный позволяет выявить 8 из 40 типов вируса.

Даджейн тест — единственный анализ, позволяющий прогнозировать риск развития патологии и выявить ее на ранних стадиях. Если тест покажет заражение ВПЧ высокой онкогенности, значит, пациентка должна наблюдаться у врача, ежегодно проходить цитологическое исследование и дайджен тест.

Другие

HPV скрининг включает кольпоскопию, биопсию нароста с гистологическим исследованием и иммуноферментный анализ.

Кольпоскопия проводится у женщин. Врач-гинеколог с помощью микроскопа осматривает стенки влагалища, слизистую оболочку шейки матки. При наличии патологии выявляет дисплазию, эрозию.

Биопсия помогает исследовать образец ткани под микроскопом и определить природу заболевания (злокачественное или доброкачественное). У пациента берется небольшой участок тканей и направляется на гистологическое исследование.
ИФА исследует кровь и показывает наличие антител к вирусным агентам.
Комплексное обследование помогает на ранних стадиях выявить патологию, перерождение тканей в злокачественные, предупредить серьезные осложнения заболевания, снизить смертность от рака.

Расшифровка результатов анализов скрининга

После получения результатов диагностики на руки следует посетить лечащего врача. Диагноз не ставится только по результатам анализа. Доктор должен оценить полную картину (клинические проявления, данные проведенных исследований).

Если скрининг показал положительный результат, значит, пациент заражен ВПЧ. Существует несколько вариантов лечебной тактики, которая зависит от проявления заболевания:

1. Первый вариант — результат ВПЧ положительный, но симптомы инфекции отсутствуют. Доктор назначает противовирусные, иммуномодулирующие препараты коротким курсом для укрепления иммунитета и уменьшения концентрации папилломавируса. Пациент должен вести здоровый образ жизни, питаться качественными продуктами, своевременно лечить обострения хронических заболеваний. Соблюдение рекомендаций предотвращает проявления инфекции и возникновение осложнений.
2. Второй вариант — результат положительный, на теле человека есть бородавки. Врач назначает длительный курс противовирусных, иммуномодулирующих средств, витаминных препаратов. Пациент должен избегать факторов, провоцирующих заболевания, контролировать течение патологии с помощью ежегодного скрининга. Доктор совместно с больным решает вопрос о способе удаления бородавок: консервативными или аппаратными методами.

Если тест отрицательный, значит, здоровью пациента ничего не угрожает. В целях профилактики заражения папилломовирусной инфекцией следует вести здоровый образ жизни, соблюдать режим работы и отдыха, избегать беспорядочных половых связей.

Папилломавирусная инфекция (ВПЧ) Вирусы папилломы человека (ВПЧ) – обширная группа вирусов, инфицирующих клетки кожных покровов и слизистых человека. ВПЧ может приводить к развитию рака шейки матки и некоторых других (более редких) видов рака.
Таким образом, рак шейки матки – это первый вид рака, для которого была доказана инфекционная природа возникновения, а значит, его можно, подобно любому инфекционному заболеванию, предотвратить, регулярно проводя ВПЧ-тестирование.

Цервикальный скрининг и ВПЧ-тестирование

Цервикальный скрининг – это систематическое проведение тестирования с целью выявления патологии шейки матки у бессимптомных женщин.

Цервикальный скрининг включает несколько этапов, которые представляют собой различные исследования, которые следуют друг за другом так, что все вместе они действуют как сито, отсеивая женщин низкого риска и оставляя только женщин высокого риска развития рака шейки матки, имеющих поражения шейки матки, требующие вмешательства. Чтобы цервикальный скрининг был максимально эффективным и экономичным, он должен включать два вида тестов: скрининговые и подтверждающие.

Сравнение скрининговых и подтверждающих тестов:

Современные стратегии скрининга основываются на сочетании двух методов – ПАП-теста и ВПЧ-теста. В зависимости от возраста обследуемых женщин, достатка населения и оснащенности лабораторной службы, в разных странах используют различные алгоритмы скринига.

Сравнение различных алгоритмов скринига, применяемых в разных странах:

Последний вариант оказался не только наиболее эффективным, но и наименее затратным. Такой подход позволяет значительно снизить количество трудоемких и дорогостоящих цитологических исследований, давая возможность улучшить их качество. В РФ следует рекомендовать организовывать скрининг по 2-му или 3-му алгоритму.

Наборы реагентов

ПЦР в реальном времени - один из предпочтительных методов выполнения ВПЧ-теста. Залогом достоверного результата является соблюдение правил взятия, транспортировки и хранения биоматериала для исследования, экстракции ДНК и проведения ПЦР.

Транспортные среды и биоматериалы

У женщин забирают образцы цервикального эпителия в или, в случае одновременного проведения жидкостной цитологии, в среду для жидкостной цитологии, например, CytoScreen (Италия) или PreservCyt (США). Также возможно проведение ВПЧ-теста с использованием соскоба/мазка из влагалища, в том числе полученного самостоятельно. Практикуется выявление ДНК ВПЧ в биопсийном материале слизистой шейки матки. У мужчин получают соскоб эпителия уретры и помещают его в Транспортную среду с муколитиком (ТСМ).

Экстракция ДНК

В зависимости от используемого биоматериала рекомендуется применять следующие наборы реагентов для экстракции ДНК:

• для соскобов слизистых оболочек урогенитального тракта:
• для биоптатов слизистой:
• для образцов жидкостной цитологии:

Амплификация и детекция

АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL

Базовым набором реагентов для проведения ВПЧ-теста в рамках цервикального скрининга является , дизайн которого позволяет:

• суммарно определять количество ДНК 12-ти генотипов ВПЧ, относящихся к ВПЧ высокого канцерогенного риска
• наиболее корректно интерпретировать уровень клинической значимости той или иной вирусной нагрузки в конкретной клинической ситуации
• контролировать валидность биоматериала, взятого для анализа (благодаря оценке количества ДНК человека в образце)

Дизайн набора реагентов "АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL":

АмплиСенс® ВПЧ ВКР генотип-FL

В рамках мониторинга выявленной папилломавирусной инфекции целесообразно проводить генотипирование тех же 12-ти генотипов ВПЧ высокого канцерогенного риска для различения персистирующей и вновь возникающей инфекции с помощью набора реагентов :

Дизайн набора реагентов"АмплиСенс® ВПЧ ВКР генотип-FL":

АмплиСенс® ВПЧ ВКР генотип-титр-FL

Для одношагового исследования в цервикальном скрининге может использоваться набор реагентов , который объединяет возможности наборов АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL и АмплиСенс® ВПЧ ВКР генотип-FL, позволяя типировать 14 генотипов ВПЧ высокого канцерогенного риска и дифференцированно определять количество каждого из них:

Дизайн набора реагентов "АмплиСенс® ВПЧ ВКР генотип-титр-FL":

Контрольное исследование после удаления пораженного эпителия шейки матки проводят с использованием наборов реагентов АмплиСенс® ВПЧ ВКР скрин-титр-FL или , если единственными выявленными генотипами ВПЧ ВКР были 16 и/или 18.

Отдельная от цервикального скрининга задача - это выявление ВПЧ низкого канцерогенного риска, в частности, генотипов 6 и 11, ответственных за ~90% случаев кондиломатоза вульвы и влагалища. Набор реагентов используется для дифференциальной диагностики доброкачественных поражений слизистых оболочек, вызванных ВПЧ низкого канцерогенного риска, от требующих внимания поражений, вызванных ВПЧ высокого канцерогенного риска.

02.05.2017

Скрининг (от англ. screen – просеивать) в здравоохранении – это массовое обследование населения с целью выявления определенного заболевания или факторов, способствующих его развитию. Предусматривает проведение ряда специальных диагностических методик.

Обследование проводится для того, чтобы обнаружить болезнь в скрытый период, когда нет внешних признаков проявления. Это даст возможность начать лечение на ранней стадии, облегчить состояние пациента и снизить смертность. В советский период для обозначения скрининга использовался термин «диспансеризация».

Общие сведения о ВПЧ

О вирусе папилломы человека (ВПЧ) узнают, что это такое, когда он уже проявил себя. На слизистой поверхности гениталий у мужчин и женщин появляются остроконечные наросты – кондиломы. Более серьёзные последствия – патологическое перерождение шейки матки – становятся известны на приёме у гинеколога.

Опасность данного вируса выражается в скрытом воспалении

Медикам этот вирус известен давно: он вызывает образование папиллом и бородавок. Бить тревогу врачи и учёные стали тогда, когда проследили непосредственную связь между наличием вируса в организме и развитием опухоли шейки матки. Инфекция обнаруживается практически в каждом материале биопсии.

ВПЧ широко распространён. Знакомства с ним удаётся избежать только около 20% населения планеты. Основной путь передачи – контактный, во время интимной близости. Презервативы не защищают, но чуть снижают уровень риска передачи инфекции. Чем активнее человек ищет новых сексуальных партнёров, тем выше риск заражения. Сейчас кондиломы распространяются и в области анального отверстия, на поверхности прямой кишки.

Это связано с возрастающей популярностью анального секса. Заражение и развитие вируса может произойти от инфицированной матери к младенцу в родах. У малыша появляются наросты на гортани, генитальные бородавки. Такие клинические случаи встречаются редко, но они есть. Возможен контактно-бытовой способ заражения бородавками, если кожа имеет микроповреждения.

Особенности вируса папилломы человека

При попадании ВПЧ в организм иммунная система активно и успешно подавляет инфекцию. Но может произойти сбой противовирусного иммунитета, вирус активируется. Происходит это при ослаблении защитных сил организма (беременность, курение, химиотерапия, после пересадки органа). Тогда болезнь начинает активно развиваться.

Папилломавирус передается только от человека к человеку и приводит к изменению характера роста тканей. Штаммов ПВЧ более 100 видов. Условно их разделили на следующие группы:

• Неонкогенные папилломавирусы (HPV 1, 2, 3, 5);
• Онкогенные папилломавирусы низкого риска (в основном HPV 6, 11, 42, 43, 44);
• Онкогенные папилломавирусы высокого онкогенного риска (HPV 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 и 68).

Клинические проявления ВПЧ могут быть разные: обыкновенные бородавки, папилломы, остроконечные кондиломы (на слизистой), рак шейки матки, рак вагины, рак пениса, рак прямой кишки.

Есть несколько форм течения болезни:

1. Скрытая (латентная) форма. Вирус никак не обнаруживает себя. Диагностируется ПЦР.
2. Эписомальная форма. Активно формируются наросты. ВПЧ определяется методом ПЦР, иммуноферментного анализа.
3. Неоплазия (дисплазия). Происходят изменения в структуре клетки, которые затрагивают поверхностные слои эпителия. Диагностируется при гистологическом (цитологическом) обследовании и при кольпоскопии.
4. Карцинома. Высокий канцерогенный риск. Часто локализуется на шейке матки и диагностируется при кольпоскопии и гистологическом (цитологическом) исследовании.

Скрининг ВПЧ

Непосредственная связь между наличием ВПЧ и развитием злокачественной опухоли склонило страны ввести ВПЧ скрининг для обнаружения раннего инфицирования. Он проводится на государственном уровне в Канаде, Японии, Финляндии, США, Германии, Китае, Бразилии и других странах. Эффект от массового исследования последовал незамедлительно: снижение рака шейка матки (РШМ) на 50–80%.

Организованного скрининга ВПЧ в России нет. Постоянное профилактическое обследование проходить необходимо самостоятельно. Женщина должна быть уверенна в том, что ей не угрожает карцинома шейки матки. Это наиболее часто встречающаяся гинекологическая патология. На ранней стадии она диагностируется. Заболевание протекает бессимптомно, но легко выявляется. Изменения шейки матки происходят не мгновенно, а в течение года. Сначала развивается дисплазия (эрозия), ее обнаруживают при осмотре на приёме у гинеколога.

Врачи рекомендуют начинать проходить цитологическое обследование на РШМ после 21 года (при более раннем опыте сексуального контакта через 3 года после начала) каждые 3 года до 49 лет. Один раз в пять лет после 50 лет. После 65 лет, если вирус до этого возраста не был выявлен, можно больше не делать скрининг. Женщинам с ослабленным иммунитетом рекомендовано обследоваться ежегодно. Также врачи советуют после 30 лет каждые три года проходить тест на ДНК вируса ПЧ.

У мужчин-партнёров женщин с ВПЧ присутствие инфекции по данным исследований разнится: от 25% до 70%. Мужчина в основном носитель и рекомендуется его проверка, если у партнёрши ВПЧ проявился в виде кондилом.

ПЦР скрининг

Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) на вирусы папилломы человека. Выполняется с целью обнаружить или подтвердить отсутствие онкогенных штаммов. Берётся соскоб эпителия канала шейки матки. У мужчин – со слизистой полового члена. Не требует специальной подготовки.

Этот метод достоверен при условии соблюдения технологии его проведения. Он определяет присутствие штамма по факту наличия фрагментов ДНК. Подходит в тех случаях, когда заболевание ещё клинически не проявлено и тестирование проводится впервые. Если ВПЧ нет, тест показывает отрицательный результат. При наличии вируса хотя бы одного заявленного вида тест будет положительным. При таком исходе назначается информативное обследование.

Цитологический скрининг

Метод ранней профилактики ВПЧ ВКР (высокий канцерогенный риск) патологических процессов шейки матки. Позволяет выявить атипичные клетки эпителия. Мазок берут каждый раз на приёме у гинеколога.

Забор клеточного материала – процедура неприятная, но безболезненная. Ватным тампоном врач очищает шейку матки. Биоматериал берётся с помощью специальной щёточки, наносится на предметное стекло. В лаборатории материал исследуют под микроскопом. Для получения достоверной информации перед посещением врача не надо пользоваться вагинальными свечами, тампонами, спринцовкой. Также необходимо воздержаться двое суток от половых контактов.

За последние 50 лет обследование на атипичные клетки с использованием цитологического метода Папаниколау на три четверти уменьшило заболеваемость РШМ в мировом масштабе.

Жидкостная цитология (LBC) признана ВОЗ в качестве «золотого стандарта» как наиболее информативный метод скрининга заболеваний шейки матки. Образцы могут храниться длительное время для последующего проведения тестирования на наличие ВПЧ и других урогенитальных инфекций, а также повторных цитологических исследований. По данным зарубежных специалистов, применение этого метода один раз в два года и подтверждающее тестирование на ВПЧ среди женщин 18-24 лет позволяет сэкономить более 15 миллионов долларов.

При положительном результате обследования дополнительно проводят кольпоскопию.

Кольпоскопия

Кольпоскопический метод имеет достаточно высокий процент эффективности

Диагностический способ осмотра влагалища при помощи бинокулярной оптики – кольпоскопа. С его помощью проводят и вульвоскопию – осмотр слизистой гениталий. Исследование выявляет и определяет характер патологических изменений шейки матки. Современные кольпоскопы увеличивают изображение в 7,5 — 30 раз. В прибор можно увидеть дефекты слизистой, эрозии, кисты, полипы, кондиломы, эндометриоз, воспалительные, предраковые заболевания, образования в области вульвы, влагалища и шейки матки, РШМ.

Противопоказаний нет, специальной подготовки для проведения не надо. Кольпоскопия выполняется в любой день менструального цикла (за исключением месячных). Исследование проводится на гинекологическом кресле. Ввиду бесконтактности и безболезненности метода обезболивание в ходе процедуры не показано.

Эффективность кольпоскопического метода составляет свыше 80%. По результатам исследований врач решает вопрос о необходимости гистологического обследования с помощью биопсии.

Гистологическое исследование

Метод изучения морфологии тканей, полученных в результате биопсии или в ходе хирургических вмешательств. После забора материала выполняется его подготовка к исследованию, включающая в себя ряд этапов. В результате проверки можно сделать заключение о наличии либо отсутствии заболевания и его характере, ставится точный диагноз, а гистологическое обследование проходит 5-10 дней.

Финансовые затраты на проведение эффективного скрининга ВПЧ ВКР ниже, чем на лечение больных. Систему скрининга люди должны дополнить мерами индивидуальной профилактики с применением частого осмотра.